1 方案一：四氯化碳肝损伤模型

1.1 原理

四氯化碳(CCl₄)受到肝微粒体酶活化成为三氯甲烷自由基(CCl₃•)与蛋白质共价结合导致蛋白合成障碍、脂质分解代谢紊乱，引起肝细胞内甘油三酯(TG)蓄积。CCl₃•也能迅速与O₂结合转化为过氧化三氯甲烷自由基(CCl₃O₂•)导致脂质过氧化，从而引起细胞膜的变性损伤,致使酶渗漏以及各种类型的细胞病变，甚至坏死。

1.2实验动物

成年大鼠或小鼠，单一性别，大鼠（180－220克），每组8-12只，小鼠（18－22克），每组10-15只。

1.3 实验方法和步骤

1.3.1剂量分组及受试样品给予时间

实验设三个剂量组和一个空白对照组和一个模型对照组，以人体推荐量的10倍（小鼠）或5倍（大鼠）为其中的一个剂量组，另设二个剂量组。用CCl₄（分析纯）造成肝损伤模型，造模方式可以灌胃或腹腔注射。小鼠CCl₄灌胃浓度为1％，以食用植物油稀释，灌胃量5mL/kgBW(折合CCl₄的剂量为80 mg/kgBW)，大鼠CCl₄灌胃浓度为2－3%，灌胃量5mL/kgBW(折合CCl₄的剂量为160－240 mg/kgBW)。必要时设阳性对照组和溶剂对照组。受试样品给予时间30天，必要时可延长至45天。

1.3.2 给予受试样品的途径

经口灌胃给予受试样品，无法灌胃时将受试样品掺入饲料或饮水亦可，并记录每只动物的饲料摄入量或饮水量。

1.3.3实验步骤

每日经口灌胃给予受试样品，空白对照组和模型对照组给予蒸馏水。将动物每周称重两次，以调整受试样品剂量。于实验第30天将各组动物隔夜禁食16小时，模型组及各样品组一次灌胃给予CCl₄，空白对照组给植物油，受试组继续给予受试样品至实验结束（与CCl₄灌胃间隔4小时以上）。给予CCl₄ 后，根据实际情况于 24或48小时处死动物，取血分离血清，测定ALT、AST，并取肝脏进行病理组织学检测。

1.3.4 检测指标

血清谷丙转氨酶（ALT），谷草转氨酶（AST），肝脏病理组织检查

1.4.血清谷丙转氨酶（ALT）,谷草转氨酶（AST）的测定：

1.4.1 测定方法：可选用全自动生化分析仪或赖氏法（试剂盒）测定。

1.4.2 数据处理和结果判定

采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值< F0.05,结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05,P≤0.05,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。

受试样品组的ALT、AST与模型对照组比较，差异有显著性，可分别判定ALT、AST结果阳性。