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  • 功能学评价检验方法-对化学性肝损伤有辅助保护作用检验方法 2
功能学评价检验方法-对化学性肝损伤有辅助保护作用检验方法 2
1.5. 肝脏病理组织学变化、诊断标准和结果判定
1.5.1 实验材料:取大鼠肝脏左叶用10%福尔马林固定,从肝左叶中部做横切面取材,常规病理制片(石蜡包埋,H.E染色)。
1.5.2镜检:从肝脏的一端视野开始记录细胞的病理变化,用40倍物镜连续观察整个组织切片。可见小叶中心性肝细胞的退行性病变和少数细胞坏死。主要病变类型有肝细胞气球样变、脂肪变性、胞浆凝聚、肝细胞水样变性和细胞坏死等。
1.5.3 评分标准:
分别记录每个视野中的各种病变所占视野的面积,并累计所观察视野的病变总分。
肝细胞气球样变:(细胞肿大,胞浆残留少许。)
大致正常
气球样变的肝细胞占整个视野的1/4
气球样变的肝细胞占整个视野的1/2
气球样变的肝细胞占整个视野的3/4
气球样变的肝细胞占整个视野
0分
1分
2分
3分
4分
 
肝细胞脂肪变性:(肝细胞胞浆内出现界限清晰的脂滴空泡。)
大致正常
脂肪变性的肝细胞占整个视野的1/4
脂肪变性的肝细胞占整个视野的1/2
脂肪变性的肝细胞占整个视野的3/4
脂肪变性的肝细胞占整个视野
0分
1分
2分
3分
4分
 
胞浆凝聚:(胞浆嗜伊红增强)
大致正常
胞浆凝聚的肝细胞占整个视野的1/4
胞浆凝聚的肝细胞占整个视野的2/4
胞浆凝聚的肝细胞占整个视野的3/4
胞浆凝聚的肝细胞弥漫存在占整个视野
0分
1分
2分
3分
4分
 
水样变性:
未见水样变性的肝细胞
水样变性的肝细胞占整个视野的1/4
水样水样变性的肝细胞占整个视野的2/4
水样水样变性的肝细胞占整个视野的3/4
水样水样变性的肝细胞弥漫性存在占整个视野
0分
1分
2分
3分
4分
 
肝细胞坏死:(胞浆嗜伊红变,凝固性坏死)
未见坏死细胞
散在个别细胞占整个视野的1/4
坏死细胞占整个视野的2/4
坏死细胞占整个视野的3/4
坏死细胞弥漫性存在占整个视野
0分
1分
2分
3分
4分
 
1.5.4 数据处理和病理结果判定
采用方差分析,但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验,方差齐,计算F值,F值< F0.05,结论:各组均数间差异无显著性;F值≥F0.05,P≤0.05,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计;对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换,待满足正态或方差齐要求后,用转换后的数据进行统计;若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的,改用秩和检验进行统计。
1.5.4.1受试样品任何一个剂量组与模型对照组之间,气球样变、脂肪变性、胞浆凝聚、水样变性或肝细胞坏死等肝细胞病变中,肝细胞坏死程度减轻,差异有显著性,而其它病变类型与模型对照组比较明显减轻或无明显差异,可判断动物实验病理结果阳性。
1.5.4.2受试样品任何一个剂量组与模型对照组之间,气球样变、脂肪变性、胞浆凝聚、水样变性这四种肝细胞病变类型加重和减轻同时存在,差异有显著性,且肝细胞坏死程度减轻,差异有显著性,则可将其各种病理变化的得分相加,肝细胞坏死评分2倍计入,以总分进行统计分析,若差异有显著性,可判断动物实验病理结果阳性。
 
1.6 结果判断
    在模型成立的前提下,ALT、AST两项血液生化指标中任何一项和病理结果为阳性,可判定受试样品对化学性肝损伤有辅助保护作用。
 
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