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  • 功能学评价检验方法-辅助降血糖功能检验方法 2
功能学评价检验方法-辅助降血糖功能检验方法 2
【附1】血糖值测定方法
1原理
葡萄糖氧化酶是一种需氧脱氢酶,能催化葡萄糖生成葡萄糖酸和过氧化氢,后者在过氧化物酶作用下放出氧,使4-氨基安替比林与酚氧化缩合,生成红色醌类化合物,可在波长505nm比色测定。
 
                         葡萄糖氧化酶
              葡萄糖--------→葡萄糖酸+过氧化氢
                                   
                                    过氧化物酶
      过氧化氢+酚+4-氨基安替比林------→红色醌类化合物
 
2 试剂配制
磷酸盐缓冲液(0.2mol/L,PH7.0)
0.2mol/L Na2HPO461mL,0.2mol/L KH2PO439mL混合即可。
酶试剂
葡萄糖氧化酶400u,过氧化物酶0.6mg,4-氨基安替比林10mg,叠氮钠100mg,加磷酸盐缓冲液至100mL,PH调至7。冰箱存放至少可稳定2个月。
酚试剂
酚100mg溶于100mL蒸馏水中。
酶混合试剂
取等量酶试剂和酚试剂混合。在冰箱中可存放1个月。
葡萄糖标准液
储存液:无水D-葡萄糖(A.R.)在烤箱中80℃烤4小时,冷却后,存放于干燥器中至恒重。精确称取2g以0.25%苯甲酸溶液溶解并移入100mL容量瓶中,再用苯甲酸溶液稀释至100mL。
应用液:在100mL容量瓶中准确加入储存液5mL,再用0.25%苯甲酸溶液稀释至100mL,即1mg/mL应用液。
蛋白沉淀剂
溶解磷酸氢二钠 10g 、钨酸钠10g、氯化钠9g于800mL蒸馏水中,加入1mol/L盐酸125mL,并用蒸馏水稀释至1000mL。
 
 
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