1.4．数据处理与结果判定

　　一般采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值< F0.05,结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05,P≤0.05,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。

受试样品组与模型（或老龄）对照组比较，过氧化脂质含量降低有统计学意义，判定该受试样品有降低脂质过氧化作用，实验结果阳性。

受试样品组与模型（或老龄／正常）对照组比较，抗氧化功能酶活力升高有统计学意义，判定该受试样品有升高抗氧化功能酶活力作用，实验结果阳性。

 

结果判定

过氧化脂质含量中任一指标和抗氧化功能酶活性中任一指标均为阳性，可判定该受试样品抗氧化功能动物实验结果阳性。

 

2 人体试食试验

2.1 受试者纳入标准

选年龄在45－65岁，身体健康状况良好，无明显脑、心、肝、肺、肾、血液疾患，无长期服药史，志愿受试保证配合的人群。

2.2 排除受试者标准 

2.2.1妊娠或哺乳期妇女，对保健食品过敏者。

2.2.2合并有心、肝、肾和造血系统等严重疾病患者。

2.2.3短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断者。

2.2.4不符合纳入标准，未按规定食用受试样品，无法判定功效或资料不全影响功效或安全性判断者。

2.3 受试者分组

对受试者按MDA、SOD、GSH-Px水平随机分为试食组和对照组，尽可能考虑影响结果的主要因素如年龄、性别、生活饮食习惯等，进行均衡性检验，以保证组间的可比性。每组受试者不少于50例。

2.4 试验方法

采用自身和组间两种对照设计。试验组按推荐服用方法、服用量每日服用受试产品，对照组可服用安慰剂或采用阴性对照。受试样品给予时间3个月，必要时可延长至6个月。试验期间对照组和试食组原生活、饮食不变。

2.5 观察指标

　　各项指标在试验开始及结束时各检测1次。

2.5.1 安全性指标

2.5.1.1 一般状况  包括精神、睡眠、饮食、大小便、血压等

2.5.1.2 血、尿、便常规检查

2.5.1.3 肝、肾功能检查

2.5.1.4 胸透、心电图、腹部B超检查

2.5.2功效指标

2.5.2.1 过氧化脂质含量  观察试验前后MDA的变化及MDA下降百分率。 (测定方法见1.3.3.1)

      

 

                  试验前MDA-试验后MDA

MDA下降百分率=--------------------×100%

                      试验前MDA

 

2.5.2.2 超氧化物歧化酶  观察试验前后SOD的变化及SOD升高百分率。(测定方法见1.3.4.1)

               试验前SOD-试验后SOD

SOD升高百分率=--------------------×100%

                      试验前SOD      

 

2.5.2.3 谷胱甘肽过氧化物酶  观察试验前后GSH－PX的变化及GSH－PX升高百分率。(测定方法见附1)

                试验前GSH－PX-试验后GSH－PX

GSH－PX升高百分率=-------------------------×100%

                          试验前GSH－PX 

 

2.6数据处理和结果判定

凡自身对照资料可以采用配对t检验，两组均数比较采用成组t检验，后者需进行方差齐性检验，对非正态分布或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态方差齐后，用转换的数据进行t检验；若转换数据仍不能满足正态方差齐要求，改用t’检验或秩和检验；但变异系数太大（如CV>50％）的资料应用秩和检验。在试验前组间比较差异无显著性的前提下，可进行试验后组间比较。

各功效观察指标试验前后自身比较和试食后组间比较均有统计学意义，方可判定该指标阳性。

过氧化脂质含量、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶三项实验中任一项实验结果阳性，可判定该受试样品具有抗氧化功能作用。

 

[附1] 血中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）活力测定

1 原理

　　谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）是体内存在的一种含硒清除自由基和抑制自由基反应的系统。对防止体内自由基引起膜脂质过氧化特别重要，其活力以催化GSH氧化的反应速度，及单位时间内GSH减少的量来表示，GSH和5,5’-二硫对硝基苯甲酸（DTNB）反应在GSH-Px催化下可生成黄色的5-硫代2-硝基苯甲酸阴离子，于423nm波长有最大吸收峰，测定该离子浓度，即可计算出GSH减少的量，由于GSH能进行非酶反应氧化，所以最后计算酶活力时，必须扣除非酶反应所引起的GSH减少。