1动物实验

1.1原理

生长发育包括体格、生理和神经系统发育等方面，体格发育最直观的指标是身长、体重，因此选用身长和体重作为改善生长发育功能作用的评价指标。

1.2 仪器和器材

天平、测量尺。

1.3 实验方法

1.3.1 实验动物

选用断乳大鼠，单一性别，每组8－12只。

1.3.2剂量分组及受试样品给予时间

实验设三个剂量组和一个空白对照组，以人体推荐量的5倍为其中的一个剂量组，另设二个剂量组，必要时设阳性对照组。受试样品给予时间42天，必要时可以延长至56天。

1.3.3 实验步骤

连续给予各剂量组断乳仔鼠受试样品，对照组给予溶剂。每周称2次体重、记录每周进食量。

1.3.4 观察指标

仔鼠开始实验第0天、第14天、第28天和第42天/56天的身长和体重，计算每周食物利用率和总食物利用率。

1.4 数据处理及结果判定

资料可用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值< F0.05,结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05,P≤0.05,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。

 

结果判定

实验第28天体重、身长和结束时（第42天/56天）的体重、身长（处死动物测量）高于对照组，且差异有显著性，同时实验组的食物利用率不明显低于对照组，可判定该受试样品改善生长发育动物实验结果阳性。

2 人体试食试验

2.1 受试者纳入标准

选择无器质性疾病，身高或体重低于同年龄组平均水平1个标准差内的6－10岁儿童。

2.2 受试者排除标准

2.2.1 急、慢性腹泻的儿童。

2.2.2 有心、肝、肾和造血系统等全身性疾病的儿童。

2.2.3 短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断者。

2.2.4 未坚持服用受试样品者。

2.3 试验设计及分组要求

采用自身和组间两种对照设计。按受试者的体重、身高随机分为试食组和对照组，尽可能考虑影响结果判定的主要因素如胸围、上臂围、体内脂肪含量以及年龄、运动和家庭经济水平等，进行组间均衡性检验，以保证两组间的可比性。每组受试者不少于50例。

2.4.受试样品的剂量和使用方法

试食组按说明书推荐的服用方法和用量服用受试产品，对照组可服用安慰剂或采用阴性对照。观察时间不少于3个月，必要时可以延长至6个月。实验期间不改变原来的饮食习惯，正常饮食。

2.5 观察指标：

2.5.1 安全性指标

2.5.1.1 一般状况  包括精神、睡眠、饮食、大小便等

2.5.1.2 红细胞计数、白细胞计数

2.5.1.3 尿常规

2.5.2  功效性指标

2.5.2.1 身高

2.5.2.2体重

2.5.2.3胸围

2.5.2.4上臂围

2.5.2.5 体内脂肪含量

2.6 试验方法

2.6.1 身高、体重、胸围、上臂围测定

2.6.1.1方法

采用经校准的标准身高体重计和皮尺测定身高、体重、胸围、上臂围。

2.6.1.2 结果判定

试验前后自身比较和试验后组间比较，身高、体重、胸围、上臂围增加，经统计差异有显著性，可分别判定该指标结果为阳性。

2.6.2体内脂肪含量测定

2.6.2.1方法

 

    体内脂肪总量和脂肪占体重百分率，用水下称重法或电阻抗法。

2.6.2.2 结果判定

试食后试食组体内脂肪含量在正常值范围内，可判定该试验结果为阴性。

2.7 数据处理及结果判定

试验数据为计量资料，可用t检验进行分析。凡自身对照资料可以采用配对t检验，两组均数比较采用成组t检验，后者需进行方差齐性检验，对非正态分布或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐性后，用转换的数据进行t检验；若转换数据仍不能满足正态或方差不齐，改用t’检验或秩和检验；但变异系数太大（如CV>50％）的资料应用秩和检验。记忆商在试验前组间比较差异无显著性的前提下，可进行试验后组间比较。

 

结果判定

试食组身高阳性，体重、胸围、上臂围三项指标中任一项高于对照组，经统计差异有显著性。体内脂肪含量在正常范围内，并排除膳食因素和运动对结果的影响，可判定该受试样品具有改善生长发育功能作用。