《保健食品原料目录褪黑素》及原料技术要求

时间： 2022-03-01 作者：来源：

导读： 《保健食品原料目录褪黑素》原料名称每日用量功效名称用量范围适宜人群不适宜人群注意事项褪黑素1-3mg成人少年儿童、孕妇、乳母从事驾驶、

《保健食品原料目录褪黑素》

原料名称	每日用量				功效
名称	用量范围	适宜人群	不适宜人群	注意事项	功效
褪黑素	1-3mg	成人	少年儿童、孕妇、乳母	从事驾驶、机械作业或危险操作者，不要在操作前或操作中食用。自身免疫症（类风湿等）及甲亢患者慎用。	改善睡眠

褪黑素原料技术要求

【来源】

褪黑素原料是以合成的5-甲氧基色胺经过乙酰化制得。化合物名称为N-乙酰基-5-甲氧基色胺，分子式为C₁₃H₁₆N₂O₂。

【感官要求】

应符合表1规定。

表1 感官指标

项目	要求
色泽	白色或类白色
状态	结晶状颗粒或粉末

【鉴别】

在【标志性成分指标】项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。

【理化指标】

应符合表2规定。

表2 理化指标

项目	指标	检验方法
5-甲氧基色胺，% ≤	0.1	15-甲氧基色胺的测定
干燥失重，% ≤	0.5	2干燥失重的测定
炽灼残渣，% ≤	0.1	3炽灼残渣的测定
铅（以Pb计），mg/kg ≤	2.0	GB 5009.12
总砷（以As计），mg/kg ≤	1.0	GB 5009.11
总汞（以Hg计），mg/kg ≤	0.3	GB 5009.17

15-甲氧基色胺的测定

1.1 试剂和材料

1.1.1 5-甲氧基色胺标准物质

1.1.2 甲醇溶液：70 %

1.1.3 甲醇：色谱纯

1.1.4 三氟乙酸：分析纯

1.2仪器和设备

1.2.1 电子天平

1.2.2 超声清洗器

1.2.3 高效液相色谱仪

1.3对照品溶液的制备

精密称定5-甲氧基色胺约50mg，置50mL量瓶中，加70%甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取适量上述溶液，用流动相定量稀释制成每1 mL中含1 μg的溶液，作为对照品溶液。

1.4供试品溶液的制备

精密称定褪黑素原料约100 mg，置于10 mL量瓶中，加70 %甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取适量上述溶液，用流动相定量稀释制成每1 mL中含1 mg的溶液，作为供试品溶液。

1.5测定

色谱条件与测定方法用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；色谱柱规格：4.6 mm×150 mm，5 μm；流动相为甲醇：0.1%三氟乙酸水溶液=35:65。检测波长：222 nm；流速:1.0 mL/min；进样量：10 μL。将上述溶液依次注入高效液相色谱仪，记录色谱图。以保留时间定性，分别测量对照品和供试品溶液峰面积。

1.6 结果计算

5-甲氧基色胺含量计算:

W = (A_u / A_s)×(c_s ×V / m)/1000×100%

式中：

W：5-甲氧基色胺含量，%；

A_u：供试品溶液的峰面积；

A_s：标准品溶液的峰面积；

m：原料的称样量（mg）；

V：总体积（mL）；

c_s：标准品溶液的浓度（μg/mL）。

2 干燥失重的测定

2.1 试剂和材料

干燥剂：五氧化二磷、无水氯化钙或硅胶。

2.2 仪器和设备

2.2.1 电子天平

2.2.2 扁形称量瓶

2.2.3 烘箱

2.2.4 干燥器

2.3分析步骤

取洁净铝制或玻璃制的扁形称量瓶，置于101 ℃-105 ℃烘箱中，瓶盖置于瓶边，加热1.0 h，取出盖好，置干燥器内冷却，称量，重复干燥1 h以上，至前后两次质量差不超过0.3 mg，即为恒重。精密称取1 g试样，放入此称量瓶中，试样厚度不超过5 mm，加盖，精密称量后，置于101 ℃-105 ℃干燥箱中，瓶盖置于瓶边，干燥2 h-4 h后，盖好取出，放入干燥器内冷却0.5 h后称量。重复以上操作干燥1 h以上，至前后两次质量差不超过0.3 mg。

2.4 结果计算

干燥失重的计算:

X=（m₁-m₂）/（m₁-m₃）×100%

式中：

X：干燥失重（%）；

m₁：称量瓶和试样的质量（g）；

m₂：称量瓶和试样干燥恒重后的质量（g）；

m₃：称量瓶干燥恒重后的质量（g）。

3 炽灼残渣的测定

3.1 试剂和材料

3.1.1 硫酸，分析纯

3.1.2 干燥剂：五氧化二磷、无水氯化钙或硅胶

3.2仪器和设备

3.2.1 电子天平

3.2.2 坩埚

3.2.3 电热板

3.2.4 马弗炉

3.2.5 干燥器

3.3分析步骤

将洗净的坩埚置于马弗炉内，在700 ℃-800 ℃下炽灼30 min以上，后在干燥器内冷却至室温，称重，精确至0.0001g。重复炽灼30 min以上，至前后两次质量差不超过0.3 mg，即为恒重。称取1 g-2 g试样放入此坩埚中，加盖，精密称量后，将其盖半掩置于电热板上，以小火加热使试样充分炭化至无烟，放冷，加硫酸0.5-1 mL使湿润，低温加热至硫酸蒸汽除尽后，700 ℃-800 ℃下炽灼1 h以上，使完全灰化，置干燥器内，放冷，精密称定。重复炽灼30 min以上，至前后两次质量差不超过0.3 mg。

3.4 结果计算

炽灼残渣计算:

X=（m₁-m₂）/（m₃-m₂）×100%

式中：

X：炽灼残渣（%）；

m₁：坩埚和灰分恒重后的质量（g）；

m₂：坩埚恒重后的质量（g）；

m₃：坩埚和试样的质量（g）。

【微生物指标】

应符合表3规定。

表3 微生物指标

项目	指标	检验方法
菌落总数，CFU/g ≤	1000	GB 4789.2
霉菌和酵母，CFU/g ≤	50	GB 4789.15
大肠菌群，MPN/g ≤	0.92	GB 4789.3 MPN计数法
沙门氏菌≤	0/25g	GB 4789.4
金黄色葡萄球菌≤	0/25g	GB 4789.10

【标志性成分指标】

应符合表4规定。

表4标志性成分指标

项目	指标	检验方法
褪黑素含量，% ≥	99.5	4 褪黑素的含量测定

4 褪黑素的含量测定

4.1 试剂和材料

4.1.1 褪黑素标准物质

4.1.2 甲醇溶液：70 %

4.1.3 甲醇：色谱纯

4.1.4 三氟乙酸：分析纯

4.2 仪器和设备

4.2.1 电子天平

4.2.2 超声清洗器

4.2.3 高效液相色谱仪

4.3 供试品溶液的制备

精密称定褪黑素原料约100mg，置于100mL量瓶中，加70%甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取适量上述溶液，用流动相定量稀释制成每1mL中含0.1mg的溶液，作为供试品溶液。

4.4 对照品溶液的制备

精密称定褪黑素标准物质约50 mg，置于50 mL量瓶中，加70 %甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取适量上述溶液，用流动相定量稀释制成每1mL中含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。

4.5测定

色谱条件与测定方法用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；色谱柱规格：4.6 mm×150 mm，5 μm；流动相为甲醇：0.1%三氟乙酸水溶液=35:65。检测波长：222 nm；流速:1.0 mL/min；进样量：10μL。将上述溶液依次注入高效液相色谱仪，记录色谱图。以保留时间定性，分别测量对照品和供试品溶液峰面积。

4.6 结果计算

褪黑素含量计算:

W = (A_u / A_s)×(c_s×V / m)×100%

式中：

W：褪黑素含量，%；

A_u：供试品溶液的峰面积；

A_s：标准品溶液的峰面积；

m：原料的称样量（mg）；

V：总体积（mL）；

c_s：标准品溶液的浓度（mg/mL）。

【储存】避光、密闭，在阴凉处保存

【产品的剂型】片剂、颗粒剂、硬胶囊、软胶囊