配方三：

①可用鸡蛋白粉代替EDTA处理酪蛋白，同时不用添加DL－蛋氨酸，因为市售蛋清粉中的铁含量（Fe7.7-8.4mg/kg）比多次用EDTA处理酪蛋白含铁还低（Fe16.5mg/kg，未处理酪蛋白含铁131.1mg/kg）。用上述配方，每公斤饲料含铁量约8～15mg。

②EDTA处理酪蛋白的制备：用去离子水配制1％的EDTA-Na₂水溶液；将酪蛋白过20目筛，用1％EDTA-Na₂溶液浸泡过夜；捞出酪蛋白放入布袋中，置洗衣机中脱水；反复用去离子水冲洗，直至完全洗净酪蛋白中的EDTA-Na_2；；脱水后，放入烤箱，80^OC烘干，研磨成粉，过20 目筛后备用。

③AIN－^76M混合盐配方（g/kg）：Calcium phosphate Dibasic,500.00;Sodium chloride, 74.00;Potassium citrate Monohydrate, 220.00;Potassium sμLfate, 52.00;Magnesium oxide ,24.00;Mangamese carbonate (43-48%Mn),3.50;Zinc carbonate (70% ZnO),1.60;Cupric carbonate (53-55%),0.30;Potassium iodate,0.01;Sodium selemite,0.01;Chromium potassium sμLfate,0.55;添加葡萄糖（原配方中为蔗糖）118.00，研磨成粉混合均匀后过20目筛。

④AIN－^76M混合维生素配方（g/kg）:Retiny acetate or retinyl palmitate (Vitamin A ), pre-mix 250.000IU/g,1.6;Cholecalciferol(vitamin D₃, 400.000IU/g),0.25;dl-α-tocopheryl acetate (250IU/g), 20.0; Thiamine·HCL,0.6;Riboflavin,0.6;Pyridoxine·HCL,0.7;Cyanocobalamin(vitamin B12),0.001;Menadione,0.005;D-biotin,0.02;Falic acid, 0.2;D-Calcium pantothenate,1.6;Nicotinic acid,3.0;添加葡萄糖（原配方中为蔗糖）972.9g,研磨成粉混合均匀后过20目筛，然后添加Choline bitartrate, 200.0充分混合，过筛。

 

配方四：

 

①混合微量元素（g%）:MgSO4·H2O73.816g,ZnSO4·7H2O19.657g,MnSO4·H2O5.733g,CuSO4·5H2O0.7315g,KIO30.0625g。

②混合维生素（g%）：维生素A（50万IU/g）1.00g，维生素D₃（20万IU/g）0.75gα－醋酸生育酚（含维生素E的明胶）12.5g，维生素K 0.04g，盐酸硫胺素0.3g，核黄素0.3g，维生素B₆ 0.3g，泛酸钙0.6g，盐酸3.00g，叶酸0.10g，维生素B₁₂(含0.1%维生素B₁₂的明胶)2.00g,葡萄糖79.11g.

 

1.4剂量分组及受试样品给予时间

实验设三个剂量组和一个低铁对照组，以人体推荐量的5倍为其中的一个剂量组，另设二个剂量组，必要时设阳性对照组（硫酸亚铁或乳酸亚铁，剂量为2ppm或2mg/kg体重, 以Fe元素计）。受试样品给予时间30天，必要时可延长至45天。

1.5 实验步骤

1.5.1 建立缺铁性贫血大鼠模型

选用健康断乳大鼠在实验环境下适应3～5天后饲予低铁饲料及去离子水（或双蒸水），采用不锈钢笼及食罐，实验过程中避免铁污染。自第3周开始每周选取部分大鼠采尾血测Hb，直至多数动物Hb低于100g/L以下时，测定全部大鼠的体重及Hb。

1.5.2 恢复实验

选取Hb<100g/L的大鼠作为实验动物，根据贫血大鼠Hb水平和体重将其随机分为低铁对照组和三个实验组，各组均继续饲予低铁饲料，低铁对照组给予相应溶剂，实验组分别给予不同剂量的受试样品，受试样品给予时间30天，必要时可延长至45天，测定体重及各项血液学指标。